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Test d’Outcherlony
TS : TP 16

détection d’un anticorps par formation d’un complexe immun

Préparation :
Anticorps avec Rastop et Anagène (ou Seqaid)

Article mis en ligne le 23 janvier 2008
dernière modification le 29 janvier 2008

par Jean-Louis
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Test d’Outcherlony

Utilisation de Rastop (ou Rasmol) pour visualiser la structure d’un anticorps.

PDF - 187.7 ko

Les fichiers nécessaires au TP :

Zip - 371.3 ko
TP anticorps

Les fichiers de séquence pour faire le TP avec Seqaid (freeware) au lieu d’Anagène (commercial)

Zip - 1.6 ko
Chaines HILM des anticorps
Zip - 2.6 ko
VIH 8 séquences
Zip - 11.6 ko
Partie variable de la chaine

Préparation :

Utiliser de l’eau distillée pour toutes les préparations.

Possibilité de remplacer les Ac par de la soude (NaOH) à 0.1 M/L et les Ag par du sulfate de zinc (ZnSo4) à 0.1 M/L

Matériel :

Par binôme

- 1 micropipette (20 µL) + 7 embouts
- 2 emporte ièces (tubes en verre)
- 2 aiguilles montées ou lancéolées.
- essuie-tout
- pot de yaourt en verre
- 4 boites de Petri petit format vides
- 1 becher pyrex
- 1 agitateur verre
- 1 pipette 10 mL en vette + propipette
- 1 flacon de 70 mL d’eau distillée.
- gaz + trépied + grille + allumettes + pince en bois

- un tube S = serum de Lapin (ou NaOh)
- un tube « 1 » = sérum de chèvre (ou eau distillée)
- un tube « 2 » = sérum de porc (ou eau distillée)
- un tube « 3 » = sérum de lapin (ou eau distillée)
- un tube « 4 » = sérum de bœuf (ou sulfate de zinc)
- un tube « 5 » = sérum de cheval (ou eau distillée)
- on pourait avoir "albumine de serum de cheval ; lactalbumine ; albumine d’œuf de poule.
- un tube « BSA » = albumine sérique de bœuf (ou sulfate de zinc)
- un tube d’agar (0.4 grammes)

Protocole de coulage des boites de Petri

Verser l’agar dans 30 mL d’eau distillée dans le becher en pyrex. Agiter pour dissoudre. Chauffer en surveillant et en agitnat. Dès que c’est transparent, couler 5 mm dans chaque boite. Laisser refroidir 15 mn sans couvercle.

Au cours suivant :

- 1 carton noir pour la lecture

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